品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN6072012699 |
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規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 人肝癌細胞HepG2.2.15索拉菲尼耐藥株 | ||
貨物編碼 | BFN6072012699 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 3類 |
培養體系 | DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES級FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(終濃度為1000U/ml) β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肝癌細胞HepG2.2.15索拉菲尼耐藥株來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結合蛋白;表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體;該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。耐藥倍數15,IC50 2100ng/ml | ||
注釋 | Characteristics: Contains 2 head to tails stably integrated HBV of the D-genotype. | ||
STR信息 | Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:9,13;D16S539:12,13;D18S51:13,14;D19S433:15.2;D21S11:29,31;D2S1338:19,20;D3S1358:15,16;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:15,16;FGA:22,25;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:17; | ||
參考文獻 | PubMed=29481805; DOI=10.1016/j.bbrc.2018.02.175 Ogura N., Ogawa K., Watashi K., Ito T., Wakita T. Novel stable HBV producing cell line systems for expression and screening antiviral inhibitor of hepatitis B virus in human hepatoma cell line. Biochem. Biophys. Res. Commun. 498:64-71(2018)
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驗收細胞注意事項
1、收到人肝癌細胞HepG2.2.15索拉菲尼耐藥株,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。
2、收到人肝癌細胞HepG2.2.15索拉菲尼耐藥株 ,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人肝癌細胞HepG2.2.15索拉菲尼耐藥株后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養。若細胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。
4、收到人肝癌細胞HepG2.2.15索拉菲尼耐藥株時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下 5-10ML 培養基繼續培養:超過 80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000 轉/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。
6、24 小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37℃,5%CO2 培養。
特別提醒: 原瓶中培養基不宜繼續使用,請更換新鮮培養基培養。