品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN60700188 |
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規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 人羊膜細胞WISH | ||
貨物編碼 | BFN60700188 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 1類 |
培養體系 | DMEM高糖培養基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone) | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 這株細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLA標記染色體和DNA指紋法分析,它的起源是HeLa細胞污染的。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。注意:這株細胞包含HeLa標記染色體,是從HeLa污染細胞中建株的。經過流式驗證,細胞純度98% 。該細胞引種自ATCC CCL-25 | ||
注釋 | Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=5641128; PubMed=566722; PubMed=1246601; PubMed=6451928; PubMed=20143388). Originally thought to originate from cells of the amniotic sac of Susan Hayflick, the daughter of Leonard Hayflick. Part of: Naval Biosciences Laboratory (NBL) collection (transferred to ATCC in 1982). Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00013. Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Genome sequenced (low read coverage). | ||
STR信息 | Amelogenin X CSF1PO 9,10 D2S1338 17 D3S1358 15,18 D5S818 11,12 D7S820 8,12 (ATCC; CCRID; JCRB; KCLB) 12 (ECACC) D8S1179 12,13 D13S317 13.3 (ATCC; CCRID; JCRB; KCLB) 14 (ECACC) D16S539 9,10 D18S51 16 D19S433 13,14 D21S11 27,28 FGA 21 TH01 7 TPOX 8,12 vWA 16,18 | ||
參考文獻 | PubMed=6451928; DOI=10.1126/science.6451928 Nelson-Rees W.A., Daniels D.W., Flandermeyer R.R. Cross-contamination of cells in culture. Science 212:446-452(1981)
CLPUB00262 Gold M. A conspiracy of cells. One woman's immortal legacy and the medical scandal it caused. (In) ISBN 9780887060991; pp.1-171; State University of New York Press; Albany (1986)
PubMed=20143388; DOI=10.1002/ijc.25242 Capes-Davis A., Theodosopoulos G., Atkin I., Drexler H.G., Kohara A., MacLeod R.A.F., Masters J.R.W., Nakamura Y., Reid Y.A., Reddel R.R., Freshney R.I. Check your cultures! A list of cross-contaminated or misidentified cell lines. Int. J. Cancer 127:1-8(2010)
PubMed=23925245; DOI=10.1038/nature12064 Adey A., Burton J.N., Kitzman J.O., Hiatt J.B., Lewis A.P., Martin B.K., Qiu R., Lee C., Shendure J. The haplotype-resolved genome and epigenome of the aneuploid HeLa cancer cell line. Nature 500:207-211(2013) |
1、收到人羊膜細胞WISH7細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。
2、收到人羊膜細胞WISH7細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人羊膜細胞WISH7細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養。若細胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。
4、收到人羊膜細胞WISH細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下 5-10ML 培養基繼續培養:超過 80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000 轉/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。
6、24 小時后,人羊膜細胞WISH細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37℃,5%CO2 培養。
特別提醒: 原瓶中培養基不宜繼續使用,請更換新鮮培養基培養。