品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN607200656 |
---|---|---|---|
規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 牛乳腺上皮細胞MAC-T | ||
貨物編碼 | BFN607200656 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 27℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 1類 |
培養體系 | DMEM高糖培養基+20%FBS+1%三抗 | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 牛乳腺上皮細胞MAC-T取自奶牛乳腺組織,貼壁,上皮樣。經過SV40永生化處理。 | ||
注釋 | Doubling time: ~17 hours (PubMed=1659986); 48 hours, in serum-free medium (PubMed=7540186). Transformant: NCBI_TaxID; 1891767; Simian virus 40 (SV40) [tsA58]. Omics: Transcriptome analysis. Anecdotal: Nexia, a former Canadian biotech company was orignally developed to make lactose-free free milk using MAC-T. | ||
STR信息 | / | ||
參考文獻 | PubMed=1659986; DOI=10.1016/0014-4827(91)90422-Q Huynh H.T., Robitaille G., Turner J.D. Establishment of bovine mammary epithelial cells (MAC-T): an in vitro model for bovine lactation. Exp. Cell Res. 197:191-199(1991) PubMed=1423654; DOI=10.1016/S0309-1651(06)80052-4 Rejman J.J., Oliver S.P., Muenchen R.A., Turner J.D. Proliferation of the MAC-T bovine mammary epithelial cell line in the presence of mammary secretion whey proteins. Cell Biol. Int. Rep. 16:993-1001(1992) Patent=US5227301 Turner J.D., Huynh H.T. Immortalized bovine mammary epithelial cell line. Patent number US5227301, 13-Jul-1993 Patent=US5455164 Turner J.D. Ruminant immortalized mammary epithelial cell lines. Patent number US5455164, 03-Oct-1995 PubMed=7540186; DOI=10.3168/jds.S0022-0302(95)76662-0 Zavizion B., Gorewit R.C., Politis I. Subcloning the MAC-T bovine mammary epithelial cell line: morphology, growth properties, and cytogenetic analysis of clonal cells. J. Dairy Sci. 78:515-527(1995) PubMed=14550508; DOI=10.1016/S0739-7240(03)00062-6 Berry S.D.K., Weber Nielsen M.S., Sejrsen K., Pearson R.E., Boyle P.L., Akers R.M. Use of an immortalized bovine mammary epithelial cell line (MAC-T) to measure the mitogenic activity of extracts from heifer mammary tissue: effects of nutrition and ovariectomy. Domest. Anim. Endocrinol. 25:245-253(2003) DOI=10.4172/2329-888X.1000103 Hosseini A., Sharma R., Bionaz M., Loor J.J. Transcriptomics comparisons of Mac-T cells versus mammary tissue during late pregnancy and peak lactation. Adv. Dairy Res. 1:103-103(2013) PubMed=26659725; DOI=10.1152/ajpcell.00261.2015 Arevalo Turrubiarte M., Perruchot M.-H., Finot L., Mayeur F., Dessauge F. Phenotypic and functional characterization of two bovine mammary epithelial cell lines in 2D and 3D models. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 310:C348-C356(2016) PubMed=30055215; DOI=10.1016/j.virusres.2018.07.013 Martinez Cuesta L., Nieto Farias M.V., Lendez P.A., Barone L., Perez S.E., Dolcini G.L., Ceriani M.C. Stable infection of a bovine mammary epithelial cell line (MAC-T) w |
驗收細胞注意事項
1、收到牛乳腺上皮細胞MAC-T細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。
2、收到牛乳腺上皮細胞MAC-T細胞 ,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到牛乳腺上皮細胞MAC-T細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養。若細胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。
4、收到牛乳腺上皮細胞MAC-T細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下 5-10ML 培養基繼續培養:超過 80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000 轉/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。
6、24 小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37℃,5%CO2 培養。
特別提醒: 原瓶中培養基不宜繼續使用,請更換新鮮培養基培養。