品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFNE85427 |
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規格 | 48T/96T | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅用于科研 | 應用領域 | 生物產業 |
產品名稱:大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒
操作步驟
1.標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.加酶:每孔加入酶標試劑 100μl,空白孔除外。
4.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。
5.配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
7.顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
9.測定:以空白孔調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒