HPLC檢測也稱為高效液相色譜檢測,是在傳統液相色譜法的基礎上發展而來的一種新一代色譜測定技術,HPLC將液體作為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,各個組分在柱內被高效分離,依次進入檢測器進行測定,進而實現對樣品的檢測分析。因HPLC在原理上具有的*屬性,HPLC檢測具有靈敏度高、檢測速率快、分離效率好、應用范圍廣等優勢,通常情況下分析檢測一例樣本只需10-30分鐘左右的時間,相較于傳統液相色譜檢測大大縮短了時間成本,并且在靈敏度、重復性等檢測性能上也有不小的提升。
HPLC檢測服務實驗原理:
液相色譜法采用液體作為流動相,利用物質在兩相中的吸附或分配系數的微小差異達到分離的目的。當兩相做相對移動時,被測物質在兩相之間進行反復多次的質量交換,使溶質間微小的性質差異產生放大的效果,達到分離分析和測定的目的。被分離成單個組分后依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀。
HPLC檢測的特點:
1、高壓,壓力可達150~300kg/cm2。色譜柱每米降壓為75kg/cm2以上。
2、高速,流速為0.1~10.0mL/min。
3、高效,塔板數可達5000/米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
4、高靈敏度,紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
HPLC檢測與同類產品相比有以下優點:
1、速度快,通常分析一個樣品在15~30min,有些樣品甚至在5min內即可完成。
2、分辨率高,可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果。
3、靈敏度高,紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器可達0.1pg。
4、色譜柱可反復使用,用一根色譜柱可分離不同的化合物。
5、樣品量少,容易回收,樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。